[产品名称]
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SP6 RNA聚合酶
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[规格]
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BR,20u/ul
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[包装]
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500U
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英文名称:SP6 RNA Polymerase
其他名称:SP6核糖核酸聚合酶
级别:BR
分子量:单体约98kDa
来源:大肠杆菌细胞,含有编码相应RNA聚合酶的克隆基因
浓度:20u/ul(≥100U/ul,HC)
活力定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亚精胺,0.5mM 各种NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相应启动子序列的质粒DNA
保存缓冲:每种聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污剂和50%(V/V) 甘油
5×转录缓冲液:200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亚精胺
抑制剂:金属螯合剂,当NaC1或KC1浓度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶)时,酶活性降低超过50%,硫酸铵可使酶活性降低超过50%
失活:加入EDTA或者70℃加热10分钟
质量控制:相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能测试:体外转录反应
特点:合成掺入特殊核苷酸,如氨基-、生物素-、荧光素-、地高辛-标记的核苷酸
性状(以下信息仅供参考):液体,SP6核糖核酸聚合酶是一种依赖DNA的聚合酶,对SP6启动子序列表现高度专一性。用该酶合成RNA,仅能以SP6 DNA或克隆在SP6 启动下游的DNA作为合成模板。该酶能以32P,35S及3H标记的核苷三磷酸为底物
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)合成标记和未标记的RNA,用于杂交、体外RNA翻译;作为RNA、siRNA、RNase酶切保护分析的底物以及基因组DNA测序的模板;研究RNA的二级结构和RNA-蛋白质相互作用、RNA剪接;标记的RNA探针合成,用于印迹实验、原位杂交、microarray杂交
保存:-20℃
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为什么实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱?
有如下几个可能的原因:
待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的:如有怀疑,可复检。
标本加入叠氮钠作为防腐剂:酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂。
为何阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出?
有如下几个可能的原因:
未达要求的孵育温度及孵育时间可检出强阳性标本,但质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出:确认孵育的温度及孵育时间达到要求。
质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出:质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存。
仪器设定不正确,滤光片不匹配:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
为什么终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
可能是酶标仪参数设定不正确:重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配。
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寄标本时需注明以下情况
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
4、联系方式
5、实验后标本是否寄回
客户须知
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。